Detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. na água: otimização de um método colorimétrico

A contaminação dos corpos hídricos por microrganismos resistentes é um grande problema para a saúde pública. Os reagentes de alto custo e a longa duração das análises são fatores limitantes para o monitoramento contínuo de protozoários em sistemas de abastecimento de água. Este estudo buscou a otimização de um método de três etapas para a detecção de oocistos de Cryptosporidium spp.: concentração por centrifugação, isolamento por separação imunomagnética e detecção colorimétrica. Em amostras com concentração de oocistos conhecida, foram testadas três diluições do reagente Estreptavidina-HRP (1:5000, 1:10000 e 1:15000) e três tempos de incubação com o substrato TMB (5, 10 e 15 minutos), totalizando nove configurações experimentais em triplicata. Avaliou-se a combinação mais eficiente, equilibrando alta absorbância a 450 nm com a economia de reagentes e de tempo. Com o teste ANOVA, constatou-se que as variáveis analisadas provocam diferenças significativas na absorbância das amostras. Por fim, concluiu-se que a combinação da diluição 1:10000 com o tempo de incubação de 10 minutos resultou na análise mais eficiente. A otimização desse método de detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. pode contribuir para a viabilização do monitoramento desses patógenos, prevenindo assim a ocorrência de surtos infecciosos.